一般剛拿到手的葡聚糖凝膠為干粉顆粒。用前，可以用20倍體積的雙蒸水泡過(guò)夜?；蛘叻兴?-4個(gè)小時(shí)。記得補(bǔ)水。這樣Sephadex G/葡聚糖凝膠基本就泡好了。

　　膠泡好后，將柱子準(zhǔn)備好(下篩板裝好)，先用水沖洗兩次。將凝膠混勻(凝膠濃度要適當(dāng)，太稀會(huì)灌得很慢，而太濃的話容易產(chǎn)生氣泡，一般1體積的膠，2-3體積的水就可以)，輕輕倒入柱中，等柱中液面下降一些后，立刻補(bǔ)加，等膠體積灌得差不多時(shí)，靜置，讓膠*沉下后，再小心安置上篩板(上篩板不太好安，但多安幾次還是能夠安好的。可以先裝上篩板浸濕，輕輕斜蓋在上口，用吸頭壓入，關(guān)鍵是不能把氣泡擠入。再蓋平，此時(shí)如果篩板上有小量的膠，可以加水混勻再吸走)。此時(shí)不停的加水或者其他的緩沖液，不能讓柱子干了，如果干了，前面的工作就前功盡棄了，得重新灌了。

　　如果有條件，可以用藍(lán)色葡聚糖(1mg/ml)檢測(cè)一下柱子是否灌得均勻。檢測(cè)方法與樣品的過(guò)柱方法相同。

　　檢測(cè)合格后，就可以上樣了。樣品保證沒(méi)有沉淀，如果有的話，可以離心或者過(guò)濾去除。

　　等上篩板上的液體流完，將合適的樣品量(不超過(guò)柱體積的1/10為好)全倍加入，自然流干。再加少量緩沖液，如0.5ml或者1ml，等流完再加少量緩沖液，如此三次后，就可以多加，或者一直加懣到柱口。

　　如果下面接了檢測(cè)器的話就好辦，如果沒(méi)有檢測(cè)器，而目標(biāo)樣品有顏色，也比較好收集，如果又沒(méi)有檢測(cè)器，又沒(méi)有顏色，可能得分段收集了，這個(gè)誰(shuí)也偷不得懶。

　　等樣品收集完，就是沖上20倍柱體積的緩沖液或者水，讓小分子物質(zhì)也流出來(lái)，柱子得到再生(這個(gè)可以反向沖洗，也就是將柱子倒過(guò)來(lái)，從出口加入緩沖液，這個(gè)可以接一個(gè)合適的軟管，用一個(gè)橈杯接了水放到高處，利用重力自然往下流)。